Je cherche un protocole de préparation d’échantillon pour observer la surface d’une feuille de plante (capucine) en MEB. Merci d’avance pour votre aide .Nicolas S

Si vous disposez d’un MEB à pression contrôlée, rien de plus simple, pas de préparation. Il est préférable d’avoir également une platine refroidie par effet peltier.je peux dans ce cas vous donner quelques indications pour choisir la pression dans la chambre du MEB ? sinon en haut vide il faut un protocole de fixation ,déshydratation par point critique et métallisation. Isabelle

 coller la feuille avec scotch double face sur le plot

 assurer le contact électrique de la surface à observer avec le plot : scotch carbone, laque Ag …

 métalliser et observer

Observer la feuille fraîche – toute suite après la cueillir pour ne pas que les stomates se ferment ou déforment

Si tu veux te compliquer la vie, tu peux passer la feuille au point critique aussitôt cueilli ; Dimitri

je rejoins Isabelle, avec un MEB à pression contrôlée pas besoin de préparer l’échantillon (15kv, 20 à 40 Pa sont des conditions qui sont généralement bonnes), par contre si vous n’avez pas de platine à effet Peltier l’échantillon va se déshydrater et vous risquez d’observer des artéfacts. Sinon en mode "haut vide" vous pouvez déshydrater par la méthode de point critique ou alors faire une lyophilisation (24h suffit, il faudra jouer avec les t° et pressions pour être au plus proche de la courbe du diagramme de phase de l’eau) puis coller les feuilles soit avec du scotch carbone (attention ils n’ont pas tous la même conductivité) ou le mieux de la colle au carbone (cela adhère mieux et c’est plus conducteur), puis évaporer du carbone ou de l’or/pt si vous êtes riche. Didier